熒光蛋白手冊(cè)
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將示蹤基因敲入到小鼠內(nèi)源基因的或5'端或3'端,且與內(nèi)源基因融合表達(dá),可以確定內(nèi)源蛋白的亞細(xì)胞定位(如圖3所示)。熒光標(biāo)簽插入位置的決定因素:1. 已有文獻(xiàn)的報(bào)道,首先考慮已有的參考模型;2. N端或C端有無蛋白修飾,避免插入的位置進(jìn)行蛋白翻譯后的修飾;3. 離主要功能域遠(yuǎn)的N端或C端,確保蛋白正常功能的行使??傊瑹晒鈽?biāo)簽插入的位置應(yīng)盡量避免影響蛋白的正常功能。01熒光蛋白的由來圖2. 熒光蛋白發(fā)展史 (A), FPs的系統(tǒng)發(fā)育樹(B)02熒光蛋白的分類表1. 通用熒光蛋白參數(shù)表RFPs(紅色熒光蛋白):mCherry具有優(yōu)異光穩(wěn)定性,是最通用紅色單體(但融合表達(dá)時(shí)有較弱的齊聚效應(yīng))
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