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美鳳力臨床前大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心

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做動(dòng)物實(shí)驗(yàn),我們要分幾組?每組要幾只動(dòng)物?怎么分配動(dòng)物?一文全解答!

許多剛開(kāi)始接觸動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的小伙伴可能都會(huì)有點(diǎn)迷茫,不知道怎么給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組,要分幾組、每組要幾只動(dòng)物,怎么分配。別擔(dān)心,今天的文章就來(lái)給你一一解答。

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我們要分幾組?

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí),我們會(huì)設(shè)置不同的實(shí)驗(yàn)小組。怎么分組、每組多少動(dòng)物,這些都直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度和統(tǒng)計(jì)分析。所以,設(shè)置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組是非常重要的一步。

一般來(lái)說(shuō),我們可以分為自身對(duì)照組、平行對(duì)照組。平行對(duì)照組又可以細(xì)分為正對(duì)照組和負(fù)對(duì)照組(也就是空白對(duì)照組)。

  • 正對(duì)照組:和自身對(duì)照組做相同的操作,但不包括我們要研究的那個(gè)因子(比如治療的藥物、給藥的方法或部位)。

  • 負(fù)對(duì)照組(空白對(duì)照):什么操作都不做。

另外,還有一種常用的3組對(duì)照分組法:

設(shè)置空白對(duì)照(負(fù)對(duì)照)組、模型對(duì)照(正對(duì)照)組、陽(yáng)性對(duì)照組。

模型對(duì)照組:對(duì)疾病模型動(dòng)物做陰性處理(比如用溶劑或賦形劑)。

陽(yáng)性對(duì)照組:對(duì)疾病模型動(dòng)物用有效的藥物治療(或其他已知的有效處理)。

設(shè)計(jì)3個(gè)或以上的計(jì)量梯度。最終得到的分組如下:

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分組的時(shí)候,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)的實(shí)際情況靈活調(diào)整。比如,如果實(shí)驗(yàn)中不需要疾病模型,那就可以去掉模型對(duì)照組;如果實(shí)驗(yàn)里沒(méi)有陽(yáng)性藥,那就可以不設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照組。

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每組要幾只動(dòng)物?

樣本量并不是越大越好。樣本量大不僅實(shí)驗(yàn)操作難度會(huì)增大,還會(huì)浪費(fèi)實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),無(wú)法嚴(yán)格把控實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,也違反了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的“3R原則”(替代、減少、優(yōu)化)。但是,樣本量過(guò)少也可能導(dǎo)致最終數(shù)據(jù)沒(méi)有差異,出現(xiàn)陰性結(jié)論,這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果就不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義和說(shuō)服性。

確定每組動(dòng)物數(shù)量的方法有幾種:

第一種:最簡(jiǎn)單、適用范圍最廣的方法

在滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)動(dòng)物3R原則和統(tǒng)計(jì)學(xué)的前提下,每組至少6個(gè)樣本量。其中,實(shí)驗(yàn)小鼠每組至少10只,大鼠每組6只,體型更大的動(dòng)物每組樣本量可以適當(dāng)減少1~2只。

第二種:自由度(E)估算

自由度是方差分析中的重要指標(biāo)。當(dāng)E<10時(shí),表示樣本量過(guò)小;當(dāng)10≤E≤20時(shí),表示樣本量是正常值;當(dāng)E>20時(shí),表示樣本量過(guò)大。

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第三種:嚴(yán)格計(jì)算樣本量

如果對(duì)實(shí)驗(yàn)中的樣本量要求非常嚴(yán)格,可以使用更復(fù)雜的公式來(lái)計(jì)算。

當(dāng)基于兩組均數(shù)計(jì)算樣本量時(shí),計(jì)算公式如下:

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多組均數(shù)計(jì)算樣本量時(shí),計(jì)算公式如下:

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上面三種方法中,后兩種方法更偏向于臨床研究使用,因?yàn)樾枰紤]人群中的個(gè)體差異。但我們使用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系純化度高、個(gè)體差異小,所以大多數(shù)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)不必考慮個(gè)體差異因素的影響,可以直接參考第一個(gè)方法。同時(shí),也可以多查閱文獻(xiàn)和咨詢(xún)有經(jīng)驗(yàn)的小伙伴。

特別注意:如果實(shí)驗(yàn)中有損耗(比如動(dòng)物死亡等原因),最好在正常的樣本量基礎(chǔ)上加上可供損耗數(shù)量的樣本量。

怎么分配實(shí)驗(yàn)動(dòng)物?

為了減少個(gè)體間的差異,保證最終實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性,建議采用隨機(jī)分配的方法。分配方法要根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c對(duì)象來(lái)確定。常見(jiàn)的方法有:

1. 完全隨機(jī)設(shè)計(jì):將動(dòng)物逐一編號(hào),然后使用隨機(jī)數(shù)表將動(dòng)物分組。這個(gè)方法適用于個(gè)體之間差異較小的動(dòng)物。

2. 隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì):將所有的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為幾個(gè)區(qū)組(建議區(qū)組數(shù)量>3),區(qū)組中的樣本數(shù)量控制在區(qū)組數(shù)的2倍及以上。之后將每區(qū)組的動(dòng)物依照完全隨機(jī)設(shè)計(jì)分配至各個(gè)實(shí)驗(yàn)分組中。這個(gè)方法適用于個(gè)體間差異較大的動(dòng)物。

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