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動物實驗的無菌操作

無菌操作

無菌技術操作是在執行醫療、護理技術操作過程中,使已滅菌的物品保持無菌狀態不再受污染,防止任何微生物進入機體的一種方法。無菌操作是控制感染的基本途徑,做好無菌化控制,能夠盡量將創口污染和術后感染發生的概率降到最低。在動物實驗的時候需不需要注意無菌操作呢?答案是肯定的,大多數實驗動物在術后需要飼養相當長的一段時間,為準確觀察器械或手術操作對于動物的影響,需盡可能排除其它因素對動物造成影響,無菌操作是排除環境因素造成動物術后感染的關鍵一步。因此,在進行手術、穿刺、注射、換藥、插導管等各項操作時,必須提前做好對應的準備,確保各個流程都能夠達到無菌化操作要求,防止細菌進入機體,預防細菌感染。

手術室中的人員、手術器械、相關設備和實驗動物本身,在消毒處理不徹底的情形下,這些環節都有可能出現感染現象。下面我們從動物實驗方面簡單介紹下無菌操作。


術前準備


01、環境清潔

實驗室內空氣污染是動物外科手術感染的主要原因,可采用紫外線照射法和甲醛熏蒸法對實驗室進行消毒。進行無菌技術操作前半小時,停止衛生處理,減少人員走動,以降低室內空氣中的塵埃。

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02、個人準備

無菌操作前,衣帽穿戴整潔,口罩遮住口鼻,修剪指甲、洗手。進行外科洗手法及外科手消毒,兩洗兩消;在穿無菌手術衣及戴無菌手套時,手不應接觸手術衣和手套的外面。

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03、用物準備

無菌物品必須存放于無菌包或無菌容器內,無菌包外注明物品名稱,有效期一周為宜,并按有效期先后順序排放。注意手術包裝袋的外包裝,如果出現破損、潮濕現象,則應當視為被污染,需要更換處理,必要時使用一次性無菌用品。無菌物品和非無菌物品應分別放置。實驗人員手術前應籌劃好手術所需一切材料(包括手術中用到的儀器、器械、敷料等),準備好并帶入手術實驗室(在術中再進出手術實驗室將增加動物感染風險)。

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手術階段


01、動物無菌手術所用的耗材均應事先消毒滅菌并烤干,無菌用品均放置在清潔區域,避免手術者以外的人接觸。
02、用完的物品要有指定位置存放(即手術中用過與未用的物品要分開放置);如要反復使用(如手術器械),應做好清潔消毒工作,及時用75%乙醇消毒。可提前準備兩個腎形盤(一個盛消毒酒精,另一個盛生理鹽水),最好是不銹鋼材質的。在無菌區內,必須要保持所有物品的可視化,因為滅菌物品在可視情況下可以降低被非無菌物品污染的可能性。也就是僅能將臺面高度以上的空間視為無菌狀態,而在視線以外的創巾和繃帶等,則應視為已被污染。
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03、動物的手術、注射等部位要剃毛并用皮膚消毒劑消毒徹底。第一遍消毒液由手術區中心開始,向周圍皮膚無遺漏地涂布藥液。第一遍消毒液待干后,換敷料鉗以同樣方式涂布手術區皮膚1-2遍。污染手術,涂布消毒液由手術區周圍向中心。手不可碰到手術區。消毒皮膚完畢,鋪手術巾,然后雙手再浸泡于洗手消毒液中2-3min。手術部位皮膚消毒后,由執行消毒的醫師和器械護士,按順序于手術區周圍先鋪無菌巾,再鋪蓋無菌單。巾、單之下界要遮至手術者的腰平面以下至少30cm。鋪單后,允許將單子自手術區向周圍稍移動,不允許自周圍向手術區移動,以免污染手術區。
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04

對于手術操作人員來說,在穿好手術服之后,僅有肩部至腰部位置,手套指尖至肘關節向上5cm范圍內可以視為無菌區,這就要求在進行手術操作時,如果采用坐姿操作,則保持坐姿至手術結束,雙手要全程保持在腰部水平以上。

05

手術時間盡量縮短,減少創口與空氣接觸時間,降低感染。實驗動物的皮膚和工作人員手臂經過消毒以后只能達到相對滅菌,殘存在毛孔內的細菌對開放的切口有一定的威脅,凡與皮膚接觸的刀片和器械不應再用。手術進行中,如手套被撕破或被縫針、銳利器械刺破,應立即更換。針和器械也不可再用。

06

進行胃腸道、呼吸道、宮頸等污染手術時,在切開空腔前應用紗墊保護周圍組織,并隨時吸除外流的內容物。被污染的器械和其他物品應放在污染盤內,實行隔離。污染的縫針和針持應在等滲鹽水中涮洗。全部污染步驟完成后,手術人員應用無菌水沖洗或更換手套,以盡量減少細菌的污染。


術后護理


動物營養缺陷和外界環境的變化等都可使細菌的耐藥性增強,為提高動物抵抗力促進創傷修復,對動物應做好營養狀況的估計,保證得到充足的營養和熱量,有利于術后恢復和抵抗細菌的侵襲。動物實驗顯示,嚴重營養不良(體重喪失超過1/3時)對傷口愈合有影響。

同時,要做好術后引流、監測。傷口的感染多發生在術后15天內,癥狀主要為發熱、傷口局部紅、腫、熱、痛,有膿性分泌物。

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本質上來說,并不存在真正意義上的無菌操作,在所有的創口部位,都會存在污染現象。實驗人員必須樹立牢固的無菌觀念,嚴格遵循無菌操作的原則,養成良好的習慣。動物實驗無菌操作不僅局限于手術過程,還是貫穿在整個實驗工作中,包括實驗前期的準備、實驗中的操作、還有實驗后動物的護理。所以我們實驗人員要仔細認真把控好每個環節,這樣才能把實驗的風險降到最低,把每只實驗動物的價值體現出來。

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