應(yīng)用MTT、CCK-8比色法，檢測細(xì)胞存活和生長。MTT檢測原理為活細(xì)胞內(nèi)線粒體中的琥珀酸脫氫酶能催化外源無色的MTT形成藍(lán)色的結(jié)晶Formazan，并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的Formazan，用酶聯(lián)免疫檢測儀在一定波長處測定其吸光值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。CCK-8原理與MTT類似，其靈敏度更高，而且孵育后可以直接上機(jī)檢測，不需要DMSO溶解，操作更方便。
1.細(xì)胞接種：收到客戶細(xì)胞后，我們會(huì)用細(xì)胞計(jì)數(shù)板對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，得出細(xì)胞懸液濃度。計(jì)算出應(yīng)稀釋的倍數(shù)，按MTT或CCK-8試劑盒要求在96孔板內(nèi)接種相應(yīng)濃度的細(xì)胞懸液；
2.細(xì)胞培養(yǎng)：然后在無菌恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)接種好的96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，并實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)；
3.藥物處理并呈色：按不同濃度梯度加入藥物作用細(xì)胞；
4.溶解、比色：加入MTT或CCK-8，按操作要求孵育相應(yīng)時(shí)間，在酶標(biāo)儀內(nèi)檢測對照組和實(shí)驗(yàn)組的吸光值。并處理數(shù)據(jù)得出比色結(jié)果。（CCK-8孵育后可直接比色，MTT需要加DMSO溶解紫色晶體）
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