一、實(shí)驗(yàn)材料
MOG35-55（吉爾生物，51716）
CFA（sigma，F(xiàn)5881）
百日咳素（sigma，P7208）
二、實(shí)驗(yàn)方法
1、抗原乳化：1mg/ml的CFA和1mg/ml的MOG35-55混合乳化，利用三通管排出注射器中的空氣，冰上來回交替推動(dòng)活塞30 min，抗原呈完全乳化狀態(tài)。
（也可使用高速攪拌器，4℃攪拌2min，3-5次）
2、完全乳化的抗原使用1 ml注射器分裝，排除內(nèi)空氣后保存于冰上。
3、百日咳素（PTX）的稀釋：用1×PBS以1:25稀釋PTX至終濃度2ug/ml。
4、小鼠尾靜脈（i.v.）注射PTX，100ul/只小鼠 。
5、小鼠氣麻后，用酒精棉球消毒小鼠前肢肩胛骨與后扇部位的皮膚，皮下注射MOG35-55抗原乳化液于該四點(diǎn)處，每處50μl。
7、48 h后，每只小鼠再次尾靜脈注射100μl PTX。
8、模型誘導(dǎo)首天記為Day 0，每天統(tǒng)計(jì)小鼠體重，觀察評分 。
評分標(biāo)準(zhǔn)：
評分 | 臨床體征 | 具體表現(xiàn) |
0 | 無臨床癥狀 | 正常步態(tài)，尾巴可以移動(dòng)并抬起，如果將鼠標(biāo)固定在尾巴底部， 尾巴會(huì)纏繞在圓形物體上 |
1 | 部分軟尾 | 正常步態(tài)，尾端下垂 |
2 | 癱瘓的尾巴 | 正常步態(tài)，尾巴下垂 |
3 | 后肢輕癱，運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào) | 步態(tài)不協(xié)調(diào)，尾巴跛行，后肢對擠壓有反應(yīng) |
4 | 一條后肢癱瘓 | 步態(tài)不協(xié)調(diào)，一條后肢拖拉，尾巴跛行，一條后肢對擠壓沒有反應(yīng) |
5 | 兩條后肢癱瘓 | 步態(tài)不協(xié)調(diào)，雙后肢拖拉，尾巴跛行，雙后肢對擠壓沒有反應(yīng) |
6 | 后肢癱瘓，前肢無力 | 步態(tài)不協(xié)調(diào)，前肢用力拉扯身體，前肢在擠壓后反射，尾巴跛行 |
7 | 后肢癱瘓，前肢癱瘓 | 老鼠不能移動(dòng)，一個(gè)前肢對腳趾擠壓做出反應(yīng)，尾巴跛行 |
8 | 后肢癱瘓，前肢癱瘓 | 老鼠不能移動(dòng)，兩個(gè)前肢對腳趾擠壓沒有反應(yīng)，尾巴跛行 |
9 | 垂死的 | 沒有動(dòng)靜，呼吸遲緩 |
10 | 死亡 | |
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