目的 探究 Ａｄｒａ１ａ 調(diào)節(jié) ＬＰＳ 誘導的 ＬＢＰ 敲除小鼠（Ｌｂｐ － ／ － ）原代肝細胞炎癥反應(yīng)。
方法 利用二步 灌流法提取 ＷＴ 型、Ｌｂｐ － ／ －型小鼠原代肝細胞，構(gòu)建由 ＬＰＳ 誘發(fā)的原代肝細胞原發(fā)炎癥模型；采用加入抑制劑哌唑 嗪、轉(zhuǎn)染 ｓｉＲＮＡ 來下調(diào) ＬＢＰ 敲除小鼠原代肝細胞 Ａｄｒａ１ａ 的表達；抑制劑法將原代肝細胞分為 ３ 組分別是對照組 Ａ、ＬＰＳ 組 Ａ、抑制劑哌唑嗪組，轉(zhuǎn)染 ｓｉＲＮＡ 主要是對原代肝細胞進行分組，包括對照組 Ｂ、ＬＰＳ 組 Ｂ、ｓｉ?ＮＣ 組、ｓｉ? Ａｄｒａ１ａ 組；將 ＷＴ 型小鼠的原代肝細胞分為兩組分別為對照組（空白對照）、ＬＰＳ 組（ＬＰＳ 刺激 １２ ｈ）。 本研究以 ＷＴ 型、Ｌｂｐ － ／ －型小鼠原代肝細胞為研究對象利用 Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 方法驗證 Ａｄｒａ１ａ 在 ＬＰＳ 刺激下的變化情況，采用 ＣＣＫ?８、 ｑＲＴ?ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 等實驗方法驗證哌唑嗪及 ｓｉ?Ａｄｒａ１ａ 對 Ｌｂｐ － ／ － 小鼠的原代肝細胞的炎癥及存活率的改善情 況。
結(jié)果 在 ＬＰＳ 刺激下 Ｌｂｐ － ／ －小鼠的原代肝細胞 Ａｄｒａ１ａ 蛋白表達顯著升高（Ｐ＜０.０１），而野生型沒有顯著變化； 抑制劑哌唑嗪組及干擾組的細胞存活率顯著升高（Ｐ＜０.０１，Ｐ＜０.０５）；抑制劑哌唑嗪組及 ｓｉ?Ａｄｒａ１ａ 組的 ＴＮＦ?α、ＩＬ? １β 炎癥因子表達情況顯著降低（Ｐ＜０.０１），與細胞損傷及炎癥相關(guān)的蛋白 ｐ?ｐ３８、ｐ?ＥＲＫ、ｐ?ＪＮＫ 的表達量也顯著降 低（Ｐ＜０.０１）。
結(jié)論 ＬＰＳ 刺激 Ｌｂｐ － ／ －小鼠原代肝細胞后 Ａｄｒａ１ａ 表達上調(diào)、炎癥信號因子上調(diào)，使用哌唑嗪與 ｓｉ? Ａｄｒａ１ａ 特異性降低 Ａｄｒａ１ａ 表達后使 ＬＰＳ 相關(guān)的 Ｌｂｐ － ／ －小鼠原代肝細胞炎癥因子明顯下降，可驗證敲除 ＬＢＰ 導致 Ａｄｒａ１ａ 在 ＬＰＳ 誘導的炎癥調(diào)節(jié)中參與反應(yīng)。
閱讀原文：Ａｄｒａ１ａ調(diào)節(jié)ＬＰＳ誘導的Ｌｂｐ－／－小鼠原代肝細胞炎癥反應(yīng).pdf
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