目的 建立雙光子顯微鏡下可視化膠質瘤、壁細胞和血管的活體自發熒光的基因小鼠模型并進行 評價。
方法 以 ＰＤＧＦＲβ?Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６?ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ －基因工程小鼠為觀察壁細胞和血管結構的載體，接種 ＧＬ２６１? ＣＦＰ 小鼠膠質瘤細胞并對顱骨進行透明化，通過雙光子顯微鏡動態跟蹤觀察膠質瘤增殖侵襲過程中血管與壁細胞 的動態變化。
結果 通過基因鑒定證實 ＰＤＧＦＲβ?Ｃｒｅ ＋ ／ － ：Ｒｏｓａ２６?ｔｄＴｏｍａｔｏ ＋ ／ － 基因工程小鼠成功繁育。 對比 Ｃ５７ＢＬ／ ６ 小鼠，基因工程小鼠的形態外觀和繁殖等無顯著性差異，組織蘇木素?伊紅（ＨＥ）染色切片分析顯示臟器 發育無異常。 Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ 誘導下基因工程小鼠的 Ｃｒｅ 重組酶活性至第 ７ 天作用完全。 接種 ＧＬ２６１?ＣＦＰ 后觀察到膠 質瘤增殖侵襲的動態過程及腫瘤內血管形態結構紊亂、游離壁細胞增多。
結論 成功構建了熒光可視化壁細胞的 基因工程小鼠，分別利用異硫氰酸熒光素?葡聚糖標記血管和青色熒光標記腫瘤細胞，使用玻璃圓片與固定環替代 小鼠顱骨，實現了活體狀態下長期穩定地動態跟蹤小鼠接種腦腫瘤后血管及血管支持細胞的形態結構變化，為研 究腦膠質瘤提供了病理可視化的動物模型。
閱讀原文：雙光子顯微鏡技術下膠質瘤?壁細胞在體多熒光示蹤小鼠模型的建立及應用.pdf
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