目的 評估圍絕經(jīng)期綜合征腎陰虛證“病證結(jié)合”模型大鼠的汗液分泌情況,并探討其生化指標(biāo)的 變化。
方法 將 18 只 SD 雌性大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、陽性藥組,每組 6 只。 假手術(shù)組行假手術(shù),模型組 和陽性藥組大鼠行雙側(cè)去卵巢手術(shù),術(shù)后第 7 天給予 L?甲狀腺素(92 mg / kg),每天 1 次,連續(xù)給藥 7 d 建立圍絕經(jīng) 期綜合征腎陰虛證“病證結(jié)合”模型。 陽性藥組每日灌胃清骨散湯劑(7. 3 g / kg),假手術(shù)組和模型組灌胃等量蒸餾 水,每天 1 次,共 14 d。 采用和田?高垣試劑著色法測定大鼠足跖部汗液分泌。 酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)檢測大 鼠血清 cAMP、cGMP、LH、GnRH、E2 水平。 蛋白免疫印跡(Western Blot)法測定大鼠足趾肉墊組織的激動 M3 膽堿 能受體(M3R)、激動 β2 得上腺素能受體(β2AR)、水通道蛋白 5(aquaporin,AQP5 )表達(dá)水平。
結(jié)果 (1)與假手術(shù) 組相比,模型組出現(xiàn)體溫升高、雙耳發(fā)紅、易激惹、毛發(fā)干枯等陰虛證的典型行為學(xué)表現(xiàn),且大鼠汗液分泌顯著增 多。 (2)模型組血清 cAMP 水平顯著升高,cGMP 水平顯著降低,cAMP / cGMP 比值顯著升高,LH、GnRH 水平顯著 升高,E2 水平顯著降低。 (3)大鼠足趾組織的 M3R 表達(dá)下調(diào),β2AR、AQP5 表達(dá)水平上調(diào)。 與模型組相比,陽性藥 組體溫降低、毛發(fā)脫落減少等陰虛證典型行為學(xué)表現(xiàn)緩解;血清 cAMP 水平顯著下降,cAMP / cGMP 比值顯著降低, LH、GnRH 水平降低,但不影響血清 E2 水平。 大鼠足趾組織的 M3R 上調(diào),β2AR、AQP5 表達(dá)水平下調(diào)。
結(jié)論 去勢 聯(lián)合 L?甲狀腺素建立的圍絕經(jīng)期綜合征腎陰虛證“病證結(jié)合”模型大鼠汗液分泌顯著增多,其機(jī)制可能與 cGMP、 cAMP 及其在汗腺上調(diào)控汗液分泌的關(guān)鍵蛋白 M3R、β2AR、AQP5 的變化有關(guān)。
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